本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:小鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中小鼠乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的小鼠乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的乳酸脱氢酶(LDH)标准品和未知浓度的LDH待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乳酸脱氢酶(LDH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠乳酸脱氢酶(LDH)浓度。
试剂盒组成
1 |
20倍浓缩洗涤液 |
50ml×1瓶 |
9 |
标准品S1(9IU/L) |
0.5ml×1瓶 |
2 |
链霉亲和素-HRP |
6ml×1瓶 |
标准品S2(6IU/L) |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
标准品S3(3IU/L) |
0.5ml×1瓶 |
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4 |
生物素标记的抗-IgG抗体 |
6ml×1瓶 |
标准品S4(1.5IU/L) |
0.5ml×1瓶 |
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5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
标准品S5(0.75IU/L) |
0.5ml×1瓶 |
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6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
10 |
密封袋 |
1个 |
7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
3张 |
8 |
样品稀释液 |
6ml×1瓶 |
12 |
说明书 |
1份 |
标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl,在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl(样品最终稀释度为5倍),盖上封板膜,轻轻振荡混匀,
3. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4.