Lambda Protein Phosphatase (重组λ蛋白磷酸酶)，即λ Protein Phosphatase，是一种锰离子(Mn2+)依赖的重组表达纯化的磷酸蛋白酶，可以对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基进行脱磷酸反应。

本产品是大肠杆菌重组表达的带6×His标签的重组λ磷酸酶。该磷酸酶由λ噬菌体开放阅读框ORF221所编码，编码产物共包含221个氨基酸残基。

Lambda Protein Phosphatase可以用于蛋白的去磷酸化，从而可以用于研究蛋白磷酸化与其活性和结构的关系，以及验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性等。

酶活性单位定义：在30℃ pH7.5条件下反应1分钟，能够水解1nmol p-nitrophenyl phosphate所需的酶量定义为一个活性单位。

Lambda Protein Phosphatase酶活性鉴定结果参考图1。

图1. Lambda Protein Phosphatase酶活测定实验图。左图：pNP标准曲线。右图：Lambda Protein Phosphatase按照30、40、50、80、100、200、500倍稀释后，在50µl反应体系中的酶量分别为0.27µg、0.20µg、0.16µg、0.10µg、0.08µg、0.04µg、0.016µg，并与100mM pNPP在1×Lambda Protein Phosphatase Buffer和1×MnCl2中在30℃反应5min后，加入12.5µl 3M NaOH终止反应，测定产生的pNP在405nm吸光度，并根据pNP标准曲线，计算Lambda Protein Phosphatase酶活性。不同批次检测出来的酶活性会略有差别。

酶分子量大小：约26kDa。

纯度：纯度大于95%。

Lambda Protein Phosphatase存储液组成为：50mM This-HCl (pH7.5)，100mM NaCl，0.1mM MnCl2，0.1mM EGTA，2mM dithiothreitol (DTT)，0.01%Brij35，50%(v/v)甘油。

10× Lambda Protein Phosphatase Buffer组成为：500mM Hepes (pH7.5)，100mM NaCl，20mM DTT，0.1% Brij35。

10× MnCl2组成为：10mM MnCl2。

失活：在50mM EDTA存在的条件下，65℃加热1小时可使Lambda Protein Phosphatase失活。

包装清单：

保存条件：

-20℃保存，一年有效。如果希望保存更长时间，可以适当分装后-80℃冻存。

注意事项：

反复冻融会导致Lambda Protein Phosphatase酶活性降低。如果希望在-80℃冻存，建议适当分装后保存，以方便后续使用。在-20℃存放时不会结冻，但在-80℃冻存时会结冻。

10mM钒离子(vanadate ions)能抑制Lambda Protein Phosphatase活性约90%，50mM EDTA可以抑制Lambda Protein Phosphatase活性约95%，1% Triton X-100、0.4% Nonidet P-40、0.025% Tween 20、0.5M NaCl、0.1mM ATP、10μg/ml pepstatin A、10μg/ml leupeptin, 10μg/ml aprotinin, 0.5mM PMSF、1mM benzamidine不影响Lambda Protein Phosphatase的酶活性。

需要注意的是不同蛋白脱磷酸化反应的速率是不同的，该酶的最佳反应温度是30℃。某些样品的粗提液用该酶进行去磷酸化处理时，请注意用尽可能短的时间进行处理，同时添加适量蛋白酶抑制剂(P1005、P1010、ST505或ST506等)以减少目的蛋白的降解。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.Lambda Protein Phosphatase对不同蛋白的脱磷酸化反应有不同活性，所以在实际应用中，我们建议对酶浓度和反应时间进行优化。反应体系中，反应缓冲液为1× Lambda Protein Phosphatase Buffer并且同时加入1× MnCl2 (最终浓度为1mM)。
2.以一般的去磷酸化反应为例：在50μl反应体系中，100U的Lambda Protein Phosphatase在30分钟内可以除去相当于5μM的磷酸化的蛋白(单磷酸化)中约100%的磷酸。​