Elisa试剂盒双位点一步法的原理、应用于注意事项
【上海品牌供应商—远慕生物提供，此文仅供参考】
双位点一步法的原理
Elisa试剂盒双位点一步法应用识别抗原不同位点2个单克隆抗体（McAb）作双抗体夹心法测定。包被一个McAb后，同时加入待检抗原和另一个McAb酶标物，待检抗原上的2个抗原决定簇同时与固相McAb和酶标McAb结合，形成固相McAb-待检抗原-酶标McAb复合物，加底物通过显色反应进行测定。
双位点一步法的操作步骤
1、将1个McAb与固相载体连接，形成固相McAb。洗涤除去未结合物。
2、同时加入待检标本和酶标McAb，温育，是待检抗原和固相McAb及酶标McAb反应形成双抗体夹心复合物。洗涤除去未结合物。
3、加底物显色。
双位点一步法的应用
适用于双抗体夹心法的Elisa试剂盒，有些也可用双位点一步法检测。如HBsAg同样可用此法进行检测，其原理为：将纯化的抗HBs吸附于固相载体表面，加入待检血清（或血浆），同时加入辣根过氧化物酶标记的另一个抗HBs（酶结合物），如血清或血浆中含有HBsAg，则通过温育形成固相McAb-HBsAg-酶标McAb复合物，加入底物，通过显色反应进行测定。若血清或血浆中不含HBsAg，通过洗涤除去未结合物，加底物后就不显色。
双位点一步法的评价
由于应用McAb，双位点一步法具有很高特异性，一步法省时、简便。
当待检抗原浓度过高时，大量过剩抗原分别饱和固相McAb和酶标McAb而抑制夹心复合物的形成，这种现象称为钩状效应（hook effect），可出现假阴性结果。可将待检标本稀释后再做或提高抗体试剂的亲和力、浓度、纯度定以消除钩状效应。
Elisa试剂盒双位点一步法的原理、应用于注意事项
作者：上海远慕生物科技有限公司 2016-08-05T00:00 (访问量:3144)
上海远慕生物科技有限公司 商家主页
地 址： 上海浦东新区川沙经济园区
联系人： 俞燕熙
电 话： 021-58999639
传 真： 021-50760790
Email：m13310162040@163.com
相关咨询
各种生化分析检验系统介绍 (2017-05-08T11:28 浏览数:8099)
支原体染色检测试剂盒 (2017-01-06T16:26 浏览数:7311)
ELISA产品会出现的问题及解决办法 (2016-12-21T16:14 浏览数:6519)
远慕告知您ELISA最基本的操作原理! (2016-12-07T15:10 浏览数:12981)
远慕ELISA试剂盒实验原理和操作注意事项 (2016-10-26T16:22 浏览数:12805)
远慕生物介绍：常用电泳试剂 (2016-10-11T11:06 浏览数:6309)
远慕生物-鸡免疫球蛋白G试剂盒 (2016-09-23T09:39 浏览数:6346)
上海远慕：印度墨汁 (2016-09-07T10:20 浏览数:7004)
单细胞凝胶电泳标准操作 (2016-08-22T16:02 浏览数:12820)
胎牛血清质量该怎样辨别?看颜色就知道嘛？ (2016-09-09T10:19 浏览数:8183)
ADVERTISEMENT