人MEK激酶酶联免疫检测
试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人MEK激酶,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途: 用于人血清、血浆及相关液体样本中MEK激酶的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人MEK激酶的水平。向预先包被了人MEK激酶单克隆抗体的酶标孔中加入MEK激酶,温育;洗涤后,加入HRP标记过的MEK激酶抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人MEK激酶的浓度呈正相关。
试剂盒组成
1 |
标准品(480pmol/L) |
0.5ml |
7 |
显色剂A液 |
3ml |
2 |
标准品稀释液 |
3ml |
8 |
显色剂B液 |
3ml |
3 |
酶标包被板 |
12孔×4条 |
9 |
终止液 |
3ml |
4 |
酶标试剂 |
3ml |
10 |
说明书 |
1份 |
5 |
20倍浓缩洗涤液 |
20ml |
11 |
封板膜 |
2张 |
6 |
样品稀释液 |
3ml |
12 |
密封袋 |
1个 |
需要而未提供的试剂和器材
1.
2. 标准规格酶标仪。
3. 精密移液器及一次性吸头
4. 蒸馏水,
5. 一次性试管
6. 吸水纸
注意事项
1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5. 为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
操作程序
1. 标准品的稀释(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户请按照说明在小试管中自行倍比稀释):
240pmol/L |
(5号标准品) |
120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液 |
120pmol/L |
(4号标准品) |
120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
60pmol/L |
(3号标准品) |
120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
30pmol/L |
(2号标准品) |
120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
15pmol/L |
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