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如何选择测定指标

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-04-15T17:01 (访问量:5110)

对于研究新手来说, 常常直到写论文时才发现,因为指标选择不当,虽然测定了很多指标,但是由于这些指标相互之间关联性不强,不能相互配合得出一个明确结论,导致论文都没法写。此前的时间、试剂和实验材料就全部浪费了。
(1)包括四个层级的不同指标:生物学现象、非蛋白质的物质变化、蛋白质变化和基因变化。
就某种生物学现象而言,从因果关系链来看,基因水平的变化,引起蛋白质水平的变化;蛋白质水平的变化引起物质运输水平的变化(离子通道或者载体)或者引起代谢水平(糖、脂类、生理活性物质等);物质运输或者代谢水平的变化引起生理功能的变化;生理功能的变化最终引起特定生物学现象的产生或者消失。那么,要做一篇高水平的研究论文,就得包括以上几个层级:分子生物学、生物化学、生理学和形态学相应的指标,才能真正阐明某个生物学现象的机制。
(2)研究顺序应该是形态学、生理学、生物化学、分子生物学。这样,前一步研究成为下一步研究的基础,不至于因为茫无头绪而走偏,做无用功!
A. 通过预实验,明确形态学变化(生物学现象)。接下来的研究才有意义,为生理学研究提供线索,不至于茫无头绪,找偏研究方向。
B. 测定产生该生物学现象的可能相关的生理学指标。为生物化学研究提供线索。
C. 测定直接相关的物质种类与含量水平的变化。相对目标明确,也比较好测定。
D. 参与上述物质变化调控的蛋白质种类和水平的变化,也包括修饰状况。可以根据C的测定结果来推测D需要测定的指标。为进一步基因水平的研究提供线索。
E. 参与上述蛋白质变化调控的基因及其表达变化。
(3)如何选择密切相关的指标
对于研究而言,切忌大而空,这样难以得出明确的结论,最后论文都没办法写。正确的做法是切入点要小而准确,即选择一个小的切入点,围绕该切入点,尽可能测定所有紧密相关的数个指标,得出明确结论。然后在此前取得的研究结果基础上,再设计新的研究,一步步稳扎稳打,把研究逐步推进,最后取得大的研究结果。
为了保证细胞稳态,细胞信号传导、基因表达和代谢都呈现网络状,相互影响相互补偿。比如,H2O2含量,受到合成和降解代谢平衡的影响,催化合成的酶包括超氧化物岐化酶(SOD)和黄嘌呤氧化酶(XOD)等,催化降解的酶包括过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)等,当然也受到GPX和TPX需要的还原物质(如还原型谷胱甘肽和还原型硫氧还蛋白)含量的影响,要阐明H2O2含量变化的原因,就必须测定上述几种酶活性和相关底物的变化,才能得出明确的结论。

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