线粒体是细胞中制造能量(ATP)的细胞器,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,具有自己的DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)。人类mtDNA的长度为16,569bp,拥有有37个基因,编码了两种rRNA(12SrRNA和16S rRNA)、22种tRNA(同样转运20种标准氨基酸,只是亮氨酸和丝氨酸都有两种对应的tRNA)以及13种多肽(呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的亚基)。
人类mtDNA发生点突变,片段缺失,拷贝数变化都可能会导致危及人类健康的疾病(线粒体病)发生,如药物性耳聋(位于12S rRNA的A1555G和C1494T突变),Leber遗传性视神经病(G11778A,G3460A,和T14484C突变)、Kearns Sayre综合征(mtDNA的大片段缺失(8363-15438 bp)等。
据估计,每5000个孩子中就有1个一出生就具有因线粒体DNA变异而导致的疾病。所有的线粒体DNA都是从母亲遗传而来,某些妇女携带有害的线粒体变异,而她们自己却没有任何症状。因此,对人类线粒体进行科学研究乃至开展mtDNA突变筛查,将会极大促进对线粒体病的早发现,早诊断,早干预。为减少下一代患线粒体病的风险,适时对育龄妇女开展线粒体变异筛查的工作将具有重要的现实价值。
联川VariantPro™ Mitochondrion Panel(VariantPro™线粒体靶向文库制备试剂盒)
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l 基于革命性的VariantProTM Capture Technology
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l 靶向文库制备只需1步,人工操作只需10分钟,简单到极致
l 参照权威数据库(MITOMAP, dbSNP, 1000 Genome, Cosmic)
l 样本起始量低至5 ng
l 扩增子长度平均200 bp
l 采用PE150时,覆盖度高达99.7%
l 一个lane最多可检测3024 个样本
革命性的VariantProTM Capture Technology
VariantPro™ Capture Technology是基于多重PCR的新一代靶向测序文库制备技术,克服了长期困扰着基于PCR技术的靶向文库制备中的许多限制,如糟糕的序列均一性,丢失的靶标序列,繁复的实验流程,冗长的人工操作时间,以及高昂的前期设备投入。
对于靶向测序文库制备,当采用常规多重PCR时,通常你需要进行2至3个步骤(前期需要做大量的优化工作):多重PCR,然后进行连接反应,接着再进行一轮PCR。现在,借助VariantPro™技术,从样本到上机测序前的准备,只需一个步骤就可以完成,获取的靶向文库即可用于上机测序。这个过程中,你只需进行10分钟的人工操作,其余都是自动化完成。
借助VariantPro™技术,你可以“任性”地选择目标基因,即可靶向单个基因,也可以靶向成千上万个基因(最多达到20,000个Amplicons)。而这种灵活性全部基于两大革命性的创新——OmegaPrimer™和RelayPCR™。
RelayPCR™:基于多重PCR的创新的“接力PCR”,先进行靶向目标捕获,再自动接力到靶向文库扩增,获得均一性非常高的文库。(查看详情)