核酸提取—我们是认真的

核酸提取大致分为3大部分：破碎、提取、纯化。核酸提取是其中很重要的一个环节，核酸模板的质量很大程度上决定了下游PCR检测结果的准确性。在目前的分子诊断实验室当中，磁珠法提取和硅胶膜离心柱法提取是最常用的两种提取方法。那么，这两种提取方法各有什么特点？提取流程与原理又是什么呢？

柱式篇

硅胶膜离心柱法原理：硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性，其水化后带负电。当溶液中存在一定浓度的阳离子后，形成的阳离子桥能够中和DNA和硅醇基团之间的表面负电荷，从而使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面。反之，处于低盐水溶液状态下时，由于硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间的静电排斥，硅胶膜释放DNA。

硅胶膜离心柱法核酸提取流程：

硅胶膜离心柱法提取特点：

1、实验流程操作简单

2、价格低廉

3、提取浓度效果好，浓度高。

翌圣生物根据不同样本的提取方法提供了不同的产品选择：

Yeasen柱式核酸提取试剂盒数据展示：

1.MolPure® Cell/Tissue DNA Kit 细胞/组织DNA提取试剂盒（18700ES）

适用样本类型

各类动物的肝脏、肌肉等脏器或培养细胞

产品特点

得率高：产量高达40 µg

DNA纯度高：无蛋白质和RNA污染，可直接用于PCR、酶切和杂交等实验

快速简便：无需传统乙醇沉淀标准操作，全程30min可完成单个样本核酸提取

安全环保：无需使用酚、氯仿等有机物抽提

下游应用

动物基因型鉴定、基因克隆等

应用案例

MolPure® Cell/Tissue DNA Kit可用于小鼠基因组提取

取等量的小鼠不同组织，使用MolPure^® Cell/Tissue DNA Kit和T品牌同类产品提取基因组DNA，50 μL ddH₂O洗脱。并取1 μL洗脱液作为模板，进行扩增实验。结果显示，MolPure^® Cell/Tissue DNA Kit提取产量高，提取产物对下游扩增实验无干扰，可有效扩增4 kb基因。

图1. 琼脂糖电泳判定提取的基因组产量

图2. 琼脂糖电泳检测小鼠2 kb和4 kb的扩增条带

2.MolPure® Plant DNA Kit 植物DNA提取试剂盒（18800ES）

产品信息

MolPure^® Plant DNA Kit采用MolPure^® DNA Column P1和新型的溶液体系。提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，可在30 min内完成植物样品（100 mg新鲜植物组织或20 mg干燥植物样本）的DNA提取和纯化工作。试剂盒内的MolPure® DNA Column P1可选择性吸附核酸，不吸附蛋白质、多糖和其它非核酸类物质，得到的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。

适用样本类型

拟南芥、小麦、水稻、大豆、玉米、烟草、棉花等植物叶片、根茎、种子等；不建议用于复杂多糖多酚，次级代谢产物多的植物

产品特点

适用性广：可从多种植物样品中提取基因组DNA

DNA纯度高：无蛋白质和RNA污染，可直接用于酶切、PCR、文库构建等实验

快速简便：操作过程30 min即可完成