敲黑板啦!今天小编请到了运营部的同事,帮大家理一理傻傻分不清楚的ceRNA、ceRNA调控网络、ceRNA分析等名词,帮助大家理清实验思路,也给出了一些实验和分析建议,希望对大家研究ceRNA有帮助哦!
Q1:ceRNA、ceRNA调控网络、ceRNA分析等名词经常出现,这些概念到底有啥区别?
A:ceRNA全称competing endogenous RNA,是一种能够竞争结合RNA的作用元件。通常lncRNA和circRNA会竞争结合miRNA,我们一般把lncRNA和circRNA可以称作ceRNA。ceRNA调控网络全称ceRNA regulation network,指的是有ceRNA参与的整个调控网络cascade。而ceRNA分析指的是对整个ceRNA调控网络进行分析。一般有circRNA-miRNA-mRNA分析或lncRNA-miRNA-mRNA分析。
Q2:如果要进行ceRNA分析,从实验来说,应该从哪些地方准备呢?
A:目前ceRNA主要囊括的RNA包括mRNA, lncRNA, circRNA和miRNA,那么只需要构建两个文库:一个是通过去核糖体方式构建的文库,里面可以同时包含mRNA,lncRNA和circRNA信息,再构建一个miRNA文库,即总共两个文库就可以全方位系统解决ceRNA研究需求。
Q3:ceRNA研究的样本需求量是多少?
A:一般而言常规样本需求是去核糖体文库需要5ug,miRNA文库需要2ug。当然,联川还提供特殊样本以及低起始量样本的专业解决方案,如果样本特殊或者样品RNA量很低,则需要进行综合评判以给出最佳解决方案。
Q4:ceRNA调控网络内RNA类型好多,感觉无从下手,切入点不是很明确,有没有一些好的建议?
A:ceRNA调控网络分析中目前包含四种RNA,即mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA。其中miRNA处于调控的核心地位,当miRNA被lncRNA或circRNA这类ceRNA竞争结合时,受miRNA调控的mRNA转录水平会上升。
Q5:植物和动物的lncRNA竞争结合miRNA的碱基互补配对规则是一样的吗?
A:不一样。动物的lncRNA以及circRNA竞争结合miRNA时,分析策略与动物靶基因预测相似。植物的lncRNA和miRNA竞争结合与植物的靶基因预测规则完全不同。植物miRNA与mRNA当符合完全的碱基互补配对时,会发生剪切,靶基因会被降解。而植物的lncRNA去竞争结合miRNA时,miRNA必须符合中间部位完全不匹配,有凸起。
Q6:ceRNA结果出来之后,不知道该怎么利用数据去讲故事?
A:放心。联川为客户精心准备了ceRNA论文解读服务,并对论文进行了全方位注释,让您的ceRNA科研之路不再有烦恼。此外,我们还为客户贴心地准备了后期验证大全。若您对后期“湿试验”完全没有思路,我们还为您精挑细选了10多篇高质量工具类论文。有了这些高质量method和protocol的帮助,您的后期试验将会有如神助、如虎添翼!
Q7:是不是涉及到lncRNA,circRNA及miRNA的都只能针对ceRNA进行研究?
A:并非是这样,ceRNA只不过是这几种RNA分子调控方式中的一种,也是较为容易着手研究的机制。联川还提供lncRNA-mRNA,circRNA及其hostgene关联研究等。当然了,lncRNA和circRNA的作用机制还有多种多样,如果您想了解更多,请留言给我们。
Q8:ceRNA分析数据需要有哪些?只能针对有差异的才能做吗?
A:联川默认的ceRNA分析,是对差异表达的lncRNA、circRNA、miRNA和mRNA做ceRNA调控网络分析。当然客户也可以指定一些自己感兴趣的序列进行分析。我们可以为客户进行个性化定制的ceRNA分析。
Q9:是否mRNA,lncRNA,circRNA和miRNA都具有ceRNA调控机制呢?
A:并非如此,ceRNA调控机制作为普遍存在的现象,但是并非任何mRNA,lncRNA,circRNA都能够具有MRE,对于不具有共有MRE的mRNA,lncRNA,circRNA来说,就不存在ceRNA调控机制。
A:针对选定的ceRNA网络中的分析,进行敲除或者过表达实验,验证相对应的调控分子是否出现表达变化,具体验证方法见第六个Q&A。
好了,今天的Q&A就讲到这里了,有任何问题欢迎大家留言给小编哦~