细菌 RNA 快速提取试剂盒

Col-R0401

试剂盒应用

本试剂盒针对细菌特征开发的裂解液 BA 能够在 10 分钟内将细菌裂解，10 分钟完成细菌的提取和纯

化。该配方中含有 RNA 保护剂，能够抑制 RNA 降解、保护 RNA 完整，从而提高 RNA 产量。提取

RNA 可用于 RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

使用方法

1. 细菌培养液 1-5mL，12,000rpm 离心 1 分钟，弃培养液。

2. 加入 200μL 溶菌缓冲液 TE，混匀后加入 10μL 溶菌酶，37℃孵育 5 分钟。

3. 加入 600μL 裂解液 BA 和 10μL 蛋白酶 K，充分混匀，55℃孵育 5 分钟。

备注：如果 RNA 含量未达预期，可适当延长孵育时间至 30 分钟。

4. 12,000rpm 离心 1 分钟。取 700μL 上清。

5. 加入 350μL 无水乙醇，充分混匀。

6. 全部加入 RNA 纯化柱中，12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。

7. 向 RNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 W1，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

8. 向 RNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 W2，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

9. 重复步骤 8 一次。

10. 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。

11. 将 RNA 纯化柱放入新无 DNase 无 RNase 离心管，加入 30-50μL 洗脱液 BA，室温放置 1 分钟。

12. 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 RNA 溶液，-80℃保存。

注意事项

1、务必在超净台中进行操作，勤换手套，防止 RNA 降解。

2、尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。

3、使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 RNA 降解，勤更换吸头，防止交叉污染。

4、为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 BA 置于 65℃水浴后再使用。

5、根据后续试验要求，联系我司购买 DNase I（货号 QR0102）进行基因组消化。

常