RIPA裂解液(蛋白裂解液)
产品名称: RIPA裂解液(蛋白裂解液)
英文名称:
产品编号: HZ0259
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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RIPA裂解液(蛋白裂解液)
中文名称:RIPA裂解液(蛋白裂解液)
英文名称:
产品规格:50ml|100ml
RIPA裂解液采用优质原料配制,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。
RIPA裂解液中已含常用磷酸酶抑制剂。
储存条件:裂解液室温保存;抑制剂-20℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
● 整个过程须保持样品处于低温状态。
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
A、细胞裂解
1.裂解液制备:每 1ml冷的RIPA裂解液中加入4μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3.用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl~150μl,或一个75 cm2培养瓶加1~2ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量,细胞裂解效
率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5.在 4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
6.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B.组织裂解
1.裂解液制备:每 1ml冷的RIPA裂解液加入4μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.取100mg组织样本剪碎,加入1ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3.将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
4.将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!