毕赤酵母GS190菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 毕赤酵母GS190菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。毕赤酵母GS190菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 毕赤酵母GS190菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。培养基+10%FBS 状态

EC001 ECOS-1 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 非洲绿猴

EC002 ECOS-7 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 非洲绿猴 DMEM 贴壁

EC003 ECV-1 [Part of the Wistar SpeECial EColleECtion] 非洲绿猴肾细胞 非洲绿猴 DMEM 贴壁

EC004 Vero 非洲绿猴肾细胞 非洲绿猴 EMEM 贴壁

EC005 VERO EC1008 (E6) 非洲绿猴肾细胞 非洲绿猴 DMEM 贴壁

EC006 EBTr (NBL-4) 牛胚气管细胞 牛

EC007 MDBK (NBL-1) 牛肾细胞 牛 EMEM 贴壁

EC008 MDECK(NBL-2) 狗肾细胞 狗 1640 贴壁

EC009 Super Tube 狗肾细胞 狗

EC010 UMNSAH/DF-1 鸡胚成纤维细胞 鸡 DMEM 贴壁

EC011 ECRFK 猫肾细胞 猫

EC012 F81 猫肾细胞 猫 1640 贴壁

EC013 BHK-21 [EC-13] 仓鼠肾成纤维细胞 仓鼠 EMEM 贴壁