大肠杆菌Stbl4菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌Stbl4菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌Stbl4菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌Stbl4菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC360 MHCC97H 人高转移性肝癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC361 SSP-25 人肝胆管癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC363 JeKo-1 人套细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC364 MCF-10A 人正常乳腺上皮细胞 人 1640 贴壁

EC126 BeWo 人胎盘绒毛癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC365 MOVAS 小鼠主动脉平滑肌细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC366 MA-104 猴胚肾细胞 猴 DMEM 贴壁

EC367 HSC-4 人口腔鳞癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC540 LAD2 人肥大细胞 人 1640 悬浮

EC539 HMC-1 人肥大细胞 人 IMDM 悬浮

EC183 NCI-H1299 人非小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC433 HCC827 人非小细胞肺癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC320 IPEC-J2 猪小肠上皮细胞 猪 1640 贴壁

EC321 MARC-145 猴胚胎肾上皮细胞 猴 DMEM 贴壁

EC373 CEK 鸡胚肾细胞 鸡 DMEM 贴壁

EC374 NCI-H1770 人非小细胞肺癌细胞 人 1640 悬浮

EC375 NCI-H1092 人小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC387 KYSE30 人食管鳞癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC389 Mv-4-11 急性单核细胞白血病细胞 人 1640 悬浮

EC1127 RPMI 8226 人多发性骨髓瘤细胞 人 1640 悬浮

EC372 NALM-6 急性人B淋巴白血病细胞 人 1640 悬浮

EC378 Nthy-ori 3-1 人甲状腺正常细胞 人 F12K 贴壁

EC376 FHC 人正常结直肠粘膜细胞 人 1640 贴壁

EC379 FLS 大鼠成纤维样滑膜细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC385 HFL 人成纤维样滑膜细胞 人 1640 贴壁

EC377 HLEB3 人晶状体上皮细胞系 人 DMEM 贴壁

EC380 HN13 人口腔鳞状细胞癌细胞 人 EMEM 贴壁