通用型RNA提取试剂盒
产品名称: 通用型RNA提取试剂盒
英文名称: General RNA Extract Kit
产品编号: HZ611
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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通用型RNA提取试剂盒
中文名:通用型RNA提取试剂盒
英文名:General RNA Extract Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
产品编号 | 规格 | 目录价(¥) | 优惠价(¥) | 数量 | 操作 |
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HZ611-50T | 50T | 688 | 688 |
产品说明:
通用型RNA提取试剂盒基于Trizol的方法,适用于常规样品,包括动、植物,细菌等样品的总RNA提取。纯化好的总RNA可用于mRNA分离,RT-PCR,Northern杂交等下游分子实验。
不适用于革兰氏阳性菌以及多糖多酚含量较高的样品的RNA提取。
自备试剂:
氯仿
(一)样品处理:
1. 动植物组织:每100mg的动植物组织样品液氮研磨成粉后,加入1 mL 的裂解液。 震荡30s。
2. 细菌:每3-5 mL 的细菌沉淀,加入1mL 的裂解液,用枪轻柔吹打数次,便于细菌裂解。
3. 培养细胞:每1-5×106 细胞沉淀,加入1mL 的裂解液。用枪轻柔吹打数次,便于细胞裂解。
(二)样品纯化:
1. 将裂解物转移至一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中,然后加入 0.2 倍体积的自备氯仿(1 mL裂解液需 0.2mL 氯仿),振荡器上充分振荡混匀 30 s。
2. 12,000rpm 室温离心 3 min,吸取上清到新的离心管中,建议取900 uL上清。
3. 在上清中加入450uL无水乙醇,颠倒混匀,分两次加入同一个RNA纯化柱中(如有絮状物或沉淀产生,一并加入纯化柱中)。12,000rpm离心1min,弃穿透液。
4.在纯化柱中加入0.5mL RNA洗涤液,室温12,000rpm离心30 s,弃穿透液。
(三)RNA收集:
1.将结合有RNA的纯化柱12,000rpm 离心 1min,甩干乙醇。
2. 弃收集管,将柱芯转移到1.5mL的RNase-free离心管中,加入30-50uL RNA溶解液,室温放置 1 min,12,000 rpm离心1 min 洗脱RNA。得到的RNA可直接用于后续实验或者 -80℃ 存放。
3. 如果要提高 RNA 产量,加入30-50uLRNA溶解液重复洗脱一次,合并两次穿透液;如果要提高 RNA 浓度,使用第一次的洗脱液加回到纯化柱中重复洗脱。
注意:建议RNA用于下游实验之前,先进行质量检测。经变性琼脂糖凝胶电泳后,会有清晰的28S和18S条带,以及中间弥散的mRNA条带,其中28S条带是18S条带亮度的1.5-2倍。有时还包括跑在最前面的较暗的5S条带。A260/A280 比值1.8~2.0对应RNA纯度90-100%之间。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!