Golden HotStart Taq DNA Polymerase

描述：该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计， 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 反 转录酶、Rnase Inhibitor，在 RNA 的 LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA 的 LAMP 扩增。除此外，Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分，因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品，以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP、 Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应，扩增完毕后阳性样品为黄色，阴性样 品为红色；2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测；2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管（阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色，A3821）。 货 号 名 称 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意：Bst4.0+ Polymerase：2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase、20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor、22%海藻糖，不含甘油，可用于冻干。 储存：长期保存于-20℃，可保存 2 年。短期保存置于 4℃， 保存 3 个月，避免反复冻融。 使用方法： 1. 配制反应体系 在 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后，置于 60~68°C（首次实验采用 65°C） 进行反应 20~45min。 3. 引物及酶制品的冻干（可参考） Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理，获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 的 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品，并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。 

Golden HotStart Taq DNA Polymerase为化学修饰的热启动Taq DNA 聚合酶，独有的封闭技术使得该酶在50°C以下100%无活性，仅通过95°C加热15min后才能完全恢复活性，从而启动PCR扩增，提高PCR扩增的特异性，降低引物二聚体、非特异性条带的扩增、提高特异性PCR产物的产量。该热启动Taq酶具有5-3外切酶活性，可用作TaqMan探针的定量PCR。同时该酶扩增的PCR产物具有“A”尾巴，可直接用于TA克隆。
包装
组分名称 数量 Golden HotStart Taq DNA Polymerase(5 U/μl) 50 μl/500 μl *10XGolden HotStart PCR Buffer 1/5 ml *10×Golden HotStart PCR Buffer含25mM Mg2+，通常不再需要额外添加Mg2+即可获得良好的扩增结果。
优势
化学法修饰热启动酶，100%热启动 高特异性，有效抑制非特异性扩增 无外源性核酸污染，纯度高达99.9%，达到诊断级别
单位定义
一个活力单位即在在74°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用
PCR扩增、TaqMan探针的定量PCR、DNA测序。
储存
-20°C可保存2年。
PCR反应性能
以λDNA为模板，可以很好的扩增10 Kb的DN**段；以人类基因组DNA为模板,可以很好的扩增4 Kb的DN**段。
反应实例
	Fig . 应用不同公司的热启动Taq DNA 聚合酶扩增鸡PPAR基因片段 （522bp，72％GC含量）。 M: DNA Marker 2000, 泳道1-2: Golden HotStart Taq, 泳道3-4: T公司抗体封闭法 HotStart Taq, 泳道5-6:普通Taq酶

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