小鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M1 ELISA北京检测/小鼠M-AChRM1 ELISA试剂盒说明书

底物：各种酶都有对底物的特异性，所以使用不同种类的酶要求有不同的底物。一旦酶结合物已经确定（如AP或HRP），那么可供选择底物的范围是很有限的。在这有限底物的范围内如何选择合适的底物呢？应按下列几个条件进行选择。（1）底物在未被酶催化以前应该是无色
的，而经酶催化后有明显的颜色变化，这样可使结果分辨清楚；（2）所显色泽易干洗脱；（3）显色后的产物要求稳定，在作定量测定时所产生的有色物质应该是可溶性的；（4）价廉，易得而且无毒。

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对HRP酶结合物来说，主要通过酶的催化作用使过氧化氢还原。同时使另一个底物氧化产生色变，可供选择的底物有几种，过去都用5-氨基水杨酸，它经酶催化后产生棕色产物便于观察，缺点是容易产生沉淀，用于定量测定时有困难。目前大多数使用邻苯二胺（Ortho-Pheny lene-diamine，简称OPD），稳定、敏感，其降解产物呈桔红色，可溶。用2 mol/L H2SO4或柠檬酸终止反应，可在492nm波长的酶标比色计上测定O.D值，也可目测。

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