自备耗材：

• 如果用正置显微镜观察，需要准备 载玻片 、盖玻片、吸头
• 倒置显微镜观察，需准备 吸头。

染色步骤：（仅参考）

取1L双蒸水，把PBS全部溶解 ，后面备用。配制后可以4度保存。

• 取出准备好的细胞，吸出培养基，pbs 清洗3次。
• 用棉签搽去上室面细胞，取2ml 编号A 液固定液加入孔板，放入transwell，固定15分钟。

注意：Transwell需全侵泡在液体中。

• Pbs 洗3次，每次5分钟。
• 在孔板中加入1ml编号B试剂 染色液，使transwell侵泡在液体中，染色10分钟。
• 弃掉染色液，加入1ml  C液  ，加一滴D液 ，快速混匀，显微镜下观察。

注意：D液不能直接滴到染色的细胞上；根据自己细胞染色的颜色，自行调节加入D 调色液；如果颜色比较深，可以再加一滴D 调色液，直到调为自己认可的颜色。（下图为我公司实验结果）

• 达到满意结果后，弃掉所有液体，用PBS 清洗1次。
• 正置显微镜观察：用刀片取下膜，放在载玻片上，加1-2滴编号为E的液体封片液，盖上盖玻片,显微镜下观察。

倒置显微镜观察：直接把Transwell放在孔板里，此方法无法长时间保存，做完实验后立即照相。

细胞染色结果：

注意事项：

1. 第一次使用本试剂时建议先取 1-2 个样品做预实验，确定一个好染色时间。
2. 如果用调色液，未达到想要的颜色，可以重复染色，重新调色，直到满足自己的实验要求。
3. 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套、口罩操作。