大肠杆菌stbl2菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌stbl2菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌stbl2菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌stbl2菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC326 MH7A 关节炎成纤维细胞 人 DMDM 贴壁

EC381 RA-FLSs 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 人 DMDM 贴壁

EC496 HFLS-RA 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 人 DMDM 贴壁

EC328 J774A.1 小鼠单核细胞巨噬细胞 小鼠 DMDM 贴壁

EC329 COV434 人卵巢癌细胞 人 1640 贴壁

EC330 WM115 人黑色素瘤细胞 人 1640 贴壁

EC342 WM239a 人黑色素瘤细胞 人 DMEM 贴壁

EC350 CCD 841 CON 人正常结肠上皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC335 NCM460 人正常肠上皮细胞 人 McCoy’s 5a 贴壁

EC312 hepAD38 人肝癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC332 hCMEC/D3 永生化人脑微血管内皮细胞 人 1640 贴壁

EC339 HT-22 小鼠海马神经元细胞 小鼠 EMEM 贴壁

EC342 NSC-34 鼠神经元细胞 EMEM 贴壁

EC331 NRK-49F 大鼠正常肾成纤维细胞 大鼠 EMEM 贴壁

EC333 ES-2 人卵巢癌细胞 人 1640 贴壁

EC334 GP5D 人结肠腺癌细胞 人 L15 贴壁

EC335 HSC-T6 大鼠肝星形细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC345 GIST-T1 人胃肠道间质瘤细胞 人 McCoy’s 5a 贴壁

EC319 PC-9 人肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC348 NCI-H2228 人非小细胞系肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC330 MUTZ-3 人急性非淋巴白血病细胞 人 IMDM 悬浮

EC353 TGBC11TKB 人胃癌细胞 人 F12 贴壁

EC349 HCEC-B4G12 人角膜内皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC336 FRTL-5 大鼠甲状腺细胞 大鼠 L15 贴壁