土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒
产品名称: 土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒
英文名称: S-SC
产品编号: YS939
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: 雅吉生物
更新时间: null
使用范围: null
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正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒测定意义:
S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理:
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二**水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入40mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体30mL×1 瓶,4℃保存。
测定步骤和加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.1 |
0.1 |
试剂一(μL) |
15 |
15 |
振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴 15min |
||
试剂二(μL) |
250 |
250 |
试剂三(μL) |
750 |
|
蒸馏水(μL) |
|
750 |
充分混匀,放入 37℃水浴培养 24 小时,10000 g,4℃,离心 5min,取上清液 |
||
上清液(μL) |
200 |
200 |
试剂四(μL) |
500 |
500 |
充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀,蒸馏水稀释10倍后(可以吸取100μL,加入900μL 蒸馏水稀释;如果吸光度大于4,可以适当加大稀释倍数),510nm处蒸馏水调零,读吸光值 A。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
S-SC 活性计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。
S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062)
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V 反总:反应体系总体积:1.015mL;W:样本质量,0.1g。