DEAE Agarose 6FF(DEAE弱阴离子交换层析填料6FF)-蛋白检测-试剂-生物在线
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DEAE Agarose 6FF(DEAE弱阴离子交换层析填料6FF)

DEAE Agarose 6FF(DEAE弱阴离子交换层析填料6FF)

商家询价

产品名称: DEAE Agarose 6FF(DEAE弱阴离子交换层析填料6FF)

英文名称: DEAE Agarose 6FF(DEAE弱阴离子交换层析填料6FF)

产品编号: 20540ES25

产品价格: 0

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

使用范围: null

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 产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

DEAE Agarose 6FFDEAE弱阴离子交换层析填料6FF)

20540ES25 

25 mL

300.00

20540ES60

100 mL

788.00

20540ES76

500 mL

3600.00

 

产品描述

 

离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

本品DEAE弱阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品离子交换基团-N+(C2H5)2H

 

产品性质

 

基质(Matrix

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径(Bead size

45-165 µm

离子交换类型(Type

弱阴离子

载量(Capacity

0.11-0.16 mmol Cl-/mL 基质

流速(Flow Rate

300-700 cm/h

pH范围(pH Range

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液(Buffer

20%乙醇

 

运输和保存方法

 

冰袋运输。4-30保存,有效期5年。

 

使用方法

 

缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤。

样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

装柱(使用储液器装填)

1)用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2 cm的去离子水。

2)将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。

3)如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。

4)打开层析柱底部出口,开起泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速, 这样可避免液压对所形成柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用你所使用泵的最大流速, 这样也可以得到一个很好的装填效果(【注】在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%)。当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。

5)关闭泵,关闭层析柱出口。

6)如果使用储液器,去除储液器,将分配器至于层析柱中。

7)将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。

8)将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。

样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的DEAE Agarose 6FF中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

5  SDS-PAGE 检测

将得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE 检测纯化效果。

填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIPCleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。