Bst2.0 DNA Polymerase

描述：该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计， 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 反 转录酶、Rnase Inhibitor，在 RNA 的 LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA 的 LAMP 扩增。除此外，Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分，因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品，以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP、 Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应，扩增完毕后阳性样品为黄色，阴性样 品为红色；2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测；2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管（阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色，A3821）。 货 号 名 称 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意：Bst4.0+ Polymerase：2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase、20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor、22%海藻糖，不含甘油，可用于冻干。 储存：长期保存于-20℃，可保存 2 年。短期保存置于 4℃， 保存 3 个月，避免反复冻融。 使用方法： 1. 配制反应体系 在 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后，置于 60~68°C（首次实验采用 65°C） 进行反应 20~45min。 3. 引物及酶制品的冻干（可参考） Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理，获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 的 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品，并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。 

Bst2.0 DNA 聚合酶来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，通过基因工程手段去除了其5’-3’外切酶活性，而保留了5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是Isothermal amplification (LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高。

组分

组分名称 数量 Bst2.0 DNA Polymerase (8 U/μl) 200 μl/2 ml 10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 1.25 ml/20 ml 100 mM MgSO4 1 ml/20 ml

应用

DNA等温扩增 富含GC结构的快速测序 微量模板DNA的快速测序

单位定义

一个活力单位即在65°C条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

热失活

85°C，5min。

本公司免费为客户设计LAMP引物，需要设计引物者请来信咨询

LAMP原理

储存

-20℃可保存3年。

实例

应用Bst2.0 dna聚合酶和6对引物进行LAMP实验，1-4：不加酶，0.1μl酶，0.25μl酶，0.5μl酶。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！