冻干LAMP SYBR Green扩增试剂盒
产品名称: 冻干LAMP SYBR Green扩增试剂盒
英文名称: 冻干LAMP SYBR Green扩增试剂盒
产品编号: HZ3812A
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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冻干LAMP SYBR Green扩增试剂盒
描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 反 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA 的 LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA 的 LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP、 Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 货 号 名 称 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase:2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase、20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor、22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20℃,可保存 2 年。短期保存置于 4℃, 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 在 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C) 进行反应 20~45min。 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 的 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。
LAMP是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。 本制品通过加入SYBR Green染料对LAMP扩增进行实时监测,需要配备荧光定量PCR仪或恒温扩增荧光检测仪,且对引物的要求比较高,特异性高的引物可更好的避免假阳性的出现。 |
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组分 |
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储存 |
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LAMP SYBR Green Reagent为干粉形式,在未溶解前,该制品可-20℃长期保存,并可室温运输,性能无下降。使用前每瓶用0.75ml的LAMP Buffer溶解后,可立即使用,剩余试剂可在-20℃保存1个月,在-60℃以下长期保存。 | ||||||||
实例 |
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以AFSV标准质粒和病料提取的基因组DNA为模板应用本试剂盒和6条引物进行LAMP SYBR Green反应,NTC为不加模板的对照,结果如图。 | ||||||||
本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询 |
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注意事项 |
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(1). 为了减少交叉污染,请分区操作(试剂和模板DNA的配置操作最好在不同区域中进行)。 (2). 实验时,所需模板量取决与样品类型(0.1 ng~100 ng),可先进行预实验确定模板量。 (3). 各区物品均为专用,不可交叉使用,防止污染。 (4). 实验过程中应穿工作服,带手套,建议使用带滤芯的一次性吸嘴。 |
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!