谷草转氨酶测定试剂盒 微量法-酶-试剂-生物在线
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谷草转氨酶测定试剂盒 微量法

谷草转氨酶测定试剂盒 微量法

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产品名称: 谷草转氨酶测定试剂盒 微量法

英文名称: Micro Glutamic-oxalacetic Transaminase(GOT)Assay Kit

产品编号: BC1565

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2024-11-20T10:23:17

使用范围: null

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产品内容:

提取液:液体60mL×1瓶,4保存。

试剂一:液体3.5 mL×1瓶,4保存; 

试剂二:液体3.5 mL×1瓶,4保存;

试剂三:液体30 mL×1瓶,4保存;

标准品:液体1mL×1支,20μmol/mL丙酮酸钠标准品,4保存。

 

产品说明:

GOT 2.6.1.1广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

GOT催化 α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二**苯肼反应生成2,4-二**苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。

实验需自备的仪器和用品:

可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样品测定的准备 

1、 细胞或微生物样品的制备 :

先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。3500g4离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:

称取约0.1g组织,加入1mL提取液进冰浴行匀浆。3500g  4离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

二、测定操作表

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。

2、 标准曲线的测定

首先将标准品稀释至20μmol/mL,按下表 混合标准品和试剂一得到相应浓度标准管:

标准品(μL

试剂一(μL

标准管浓度(μmol/mL

22.5

7.5

1.5

15

15

1

12

18

0.8

6

24

0.4

3

27

0.2

1.5

28.5

0.1

0.75

29.25

0.05

0

30

0

 

3、 EP管中加入下列试剂

试剂名称(μL

测定管

对照管

标准管

待测样本

5

 

 

试剂一  

25

25

 

标准液

 

 

30

混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热30min

试剂二

25

25

25

待测样本

 

5

 

混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)准确反应20min

试剂三

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