蛋白银染试剂盒
产品名称: 蛋白银染试剂盒
英文名称: Protein Silver Stain Kit
产品编号: HZ0281
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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蛋白银染试剂盒
中文名称:蛋白银染试剂盒
英文名称:Protein Silver Stain Kit
产品规格:20次
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
试剂盒组成:
注意事项:
1、请提前准备50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇,冰醋酸。
操作步骤:
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量25ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
请提前准备好50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2、固定:用25ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3、洗脱:用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4、水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5、增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中,混匀。
6、银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验图例
BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD,上样量从左到右分别为50ng,10ng,5ng
储存条件:室温。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!