Protein G磁珠(2μm,10mg/mL)

中文名称：Protein G磁珠(2μm,10mg/mL)

英文名称：Protein G Magnetic Beads

产品规格：1ml|1ml×5

本制品使用纳米表面生物技术将Protein G包被在超顺磁性磁珠微球表面，磁珠直径为2μm。磁珠表面抗体结合位点多，非特异性结合低，使用简便有效。Protein G免疫沉淀磁珠具有大面积特异的表面区域，从而大大缩短了抗体吸附和抗原结合的时间。Protein G免疫沉淀磁珠适用的样品范围广泛，细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它的免疫抗原等均适用本产品。

保存条件：4℃，有效期24个月，禁止冷冻。

注意事项：
1．本产品pH值为6-8，禁止冻结。
2．本产品应避免离心、干燥或冻存，禁止长时间置于磁场，可能会引起磁珠聚团，抗体结合后操作过程应轻柔，避免抗体脱落。
3．为最大限度的降低蛋白质降解，请配合使用我司的蛋白酶抑制剂cocktails(货号：M20001、M20002)。
4．使用前请先通过查阅附录确认抗体所属亚型与Protein G的亲和度，如亲和度不佳，可以通过增加抗体与磁珠的孵育时间(30-120 mins)、提高结合缓冲液的pH值 (8-9)以及降低离子强度(25-100mMNaCl)等方法提高亲和效率。
5．为提高磁珠在免疫沉淀反应中的特异性，可以先将抗体与样品进行孵育，形成抗体-抗原复合物，再用Protein G磁珠捕获复合物。
6．磁珠在低pH的洗脱缓冲液中发生聚集属于正常现象。在结合/洗涤缓冲液和洗脱缓冲液中添加浓度为0.1% (V/V)的非离子型去垢剂(如NP-40、Tween-20或Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。经过低pH洗脱操作的磁珠可以用结合/洗涤缓冲液洗涤至中性，然后用含有0.1% (V/V) Tween-20的Tris Buffer (pH 7.5)振荡重悬磁珠，并用超声波水浴处理2 mins，即可使磁珠恢复均匀状态，以上处理均不影响磁珠的抗体结合效率。
7．超声处理会使磁珠在样品溶液中捕获的抗体脱落，所以磁珠在捕获抗体后不宜使用该方法重悬磁珠。
8．本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
9．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

完整RNA的提取和纯化，是进行RNA 方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点：

１）：样品细胞或组织的有效破碎；

２），有效地使核蛋白复合体变性；

３），对内源RNA酶的有效抑制；

４）有效地将RNA从DNA和蛋白混合物中分离；

5），对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键的是抑制ＲＮＡ酶活性。

RNA的提取目前阶段主要可采用两种途径:

1)，提取总核酸，再用氯化锂将RNA 沉淀出来；

2)，直接在酸性条件下抽提，酸性下DNA与蛋白质进入有机相而RNA 留在水相。第一种提取方法将导致小分子量RNA的丢失，目前该方法的使用频率已很低。

质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。

回收率能达到40％。以下几点建议：

1 尽量用新配制的TAE，（有人说TBE效果不好），但我用的是TBE

2 100bp片段在溶胶后要加入异丙醇，但我发现容易产生沉淀，堵柱子。但我不知Omega用的是什么溶胶液，你可以试一下：溶胶后加入与胶等体积的异丙醇，如用0.1g胶，加100ul异丙醇，再进行一下操作。

3 回收的样品尽量上样多一点，我一般是用4ug/100ul

探针标记各种标记物及选择方法

一、如何选择合适的一抗

二、如何选择合适的二抗

三、如何确定一抗的稀释比例

四、如何选择同型对照

五、如何选择阳性对照

核酸扩增：具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点，在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。

克隆与表达：克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达。

蛋白质研究：分泌蛋白专用蛋白酶抑制剂混合液,100X(又 组织培养基专用蛋白酶抑制剂混合液,100...其它蛋白质研究ELISA专用TMB显色液(双成分) HRP-链霉亲和素专用稀释液 MALDI。

重组蛋白：是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。

基因结构和功能：基因的定点突变是重要的分子生物学技术，广泛用于载体构建、基因改造、蛋白质功能研究等领域。但传统的方法需要使用单链DNA模板，而得到单链DNA模板又需要先将基因克隆到类似M13这种载体中，操作过程冗长。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！