大肠杆菌JM101菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌JM101菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌JM101菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌JM101菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC821 NECI-H660 人小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC822 Human podoECyte 人肾足细胞 人 MECECoy’s 5a 贴壁

EC823 ATDEC5 小鼠胚胎瘤细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC824 DB 人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC830 SU-DHL-2 人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC825 KOPN-8 人前B淋巴瘤细胞 人 IMDM 悬浮

EC826 MOPEC 小鼠少突胶质前体细胞 小鼠 EMEM 贴壁

EC831 SIREC 兔角膜上皮细胞 兔 DMEM 贴壁

EC827 FL62891 人肝细胞 人 1640 贴壁

EC828 AZ521 人胃癌细胞 人 1640 贴壁

EC829 MTEEC1 小鼠胸腺上皮细胞 小鼠 1640 贴壁

EC832 1301 人淋巴细胞 人 1640 悬浮

EC833 SUP-T1 人T淋巴母细胞瘤细胞 人 1640 悬浮

EC834 IMR-90 人胚肺成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC841 MX-1 人乳腺癌细胞 人 1640 贴壁

EC835 HEH2 人胚胎心脏成纤维样细胞 人 1640 贴壁

EC836 ID8 小鼠卵巢癌细胞 小鼠 1640 贴壁

EC837 PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC838 hEEEC 人子宫内膜上皮细胞 人 EMEM 贴壁

EC839 WB-F344 大鼠肝干细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC842 MKN-28 人胃癌细胞 人 1640 贴壁