Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别350nm和460nm。

本Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。

使用方法

1. 对于固定的细胞或组织

a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。

b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量用免疫染色洗涤液、PBS或生理盐水稀释至1×的本产品，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的1×染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

2. 对于活细胞或组织：

a. 对于培养器皿内的活细胞或组织，在培养液中均匀滴加适量的Hoechst 33342活细胞染色液(100×)至终浓度为1×，轻柔混匀。例如对于十二孔板中培养的细胞，每孔有1ml的培养液，每孔需要加入10μl Hoechst 33342活细胞染色液(100X)。培养液中的血清、酚红等都不会对染色产生干扰。

b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

注意事项：

 1、荧光染料易淬灭，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。

 2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（SL1840）