革氏阳性细菌质粒DNAout

产品及特点

本试剂盒是用于革氏阳性细菌（G+）质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。G+菌体先经碱裂解法处理，再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，全套操作可以在30分钟之内完成。其操作流程如下：使用本试剂盒可从1-5 mL过夜培养的菌液纯化得到高达20 μ g的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

1. 快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。

2. 不需要预平衡离心吸附柱。

3. 洗柱液即开即用，不需要额外加乙醇。

4. 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。

5. 产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。

6. 用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。

7. 价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。

使用及效果

将0.1-1.5 mL过夜培养的G+12000-15000 g室温离心1分钟后, 重悬于0.6 mL溶G+菌液中，颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟。12000-15000 g室温离心10分钟，小心弃上清。用和0.25 mL溶液A重悬沉淀，再与0.25 mL溶液B混匀，再加入0.35 mL溶液C，混匀，室温静止2分钟，离心10分钟，将上清转移到DNA纯化柱中，静置2分钟，离心1分钟，弃收集管中的废液，加入0.5 m L的通用洗柱液，离心1分钟，弃废液，重复上一步1次。离心1分钟，甩干残留液体，将DNA纯化柱置于新的1.5 mL离心管（自备）中，加入适量（30—100 μL）DNA洗脱液离心即得质粒DNA。