HRP 膜发光底物 AE-常用生化试剂-试剂-生物在线

产品名称： HRP 膜发光底物 AE

英文名称： HRP Blotting Atto ECL

产品编号： ECMA

产品价格： 0

产品产地：深圳

品牌商标： Durastab

更新时间： 2024-11-20T09:47:08

使用范围： null

多睿思特（深圳）医疗科技有限公司

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HRP Blotting Atto ECL 为超灵敏的增强型化学发光底物，可用于高阿克级蛋白检测。与其他市售底物相比，可提供极高水平的灵敏度和极佳的信噪比。本产品用于在 Western Blot 中针对非常低丰度蛋白获得卓越灵敏度和信噪比。

目录号 Art no: ECMA-0100/ 0500/ 1000

包装规格 Package size: 100mL/ 500mL/ 1000 mL

试剂组分 Components:

试剂 A: Art no: ECMA-A, 增强型鲁米诺溶液 (Enhanced Luminol Solution)

试剂 B: Art no: ECMA-B, 稳定过氧化物溶液 (Stabilized Peroxide Solution)

保质期 Shelf life: 3 years

储存 Storage: 2-8℃

应用 Application: Western Blot 按 1：1 预混后使用。

产品特点 Characteristics:

① 灵敏度高：低飞克级至高阿克级

② 稳定性好：在 4°C 下，工作溶液达 48 小时

③ 兼容性好：**纤维素膜和 PVDF 膜

④ 信号持续长：达六小时

⑤ 一抗稀释浓度：1:1000~1:5000 (质量浓度：0.2~1.0 μg/mL)

⑥ 二抗稀释浓度：1:100000~1:250000 (质量浓度：4~10 ng/mL)

用法说明 Instruction:

使用底物进行 Western Blot 检测：

1. 清洗膜蛋白质转移后，将印迹膜转印装置中取出，用去离子水洗涤膜 5 分钟，去除转移缓冲液。

2. 封闭膜用 DuraBlotTM Western Blot 封闭液 (如 1×酪蛋白封闭液、1×无蛋白封闭液)在室温下摇晃封闭 30-60 分钟。或者，在 2~8℃下静止封闭过夜。

3. 孵育一抗用一抗稀释液（或封闭液）稀释一抗浓度至 0.2-1μg/mL（或按照厂家推荐的稀释度），在膜上摇动孵育 1 小时，或将印迹在 2-8℃下孵育过夜。

4. 洗涤膜用洗涤液 TBST、PBST 或其他含有 0.05% Tween 20 的缓冲液清洗膜 10 分钟，重复洗涤 2 次。

5. 孵育酶标二抗用酶标二抗稀释液稀释酶标二抗浓度至 4-10ng/mL 或 1:100000-1:250000（1mg/mL），在室温下摇动孵育印迹 30 分钟至 1 小时。

6. 清洗膜用洗涤液清洗膜 6 次，每次 5 分钟，以彻底去除任何未结合的酶标抗体。

7. 准备底物通过混合等量的底物 A 和稳定的过氧化物 B 成分来制备底物工作液(如将 5 毫升增强型鲁米诺溶液与 5 毫升稳定过氧化物溶液混合)。使用足够体积的底物以确保印迹膜被底物完全润湿，并且印迹不会变干(0.1 mL/cm2 )。

8. 底物孵育将膜与底物工作液孵育反应 5 分钟。

9. 膜成像

① 从工作溶液中取出印迹，并将其置于塑料保护套或透明塑料膜中；

② 用无尘吸水纸除去多余的液体，并小心地压出印迹膜上的气泡；

③ 使用成像系统对印迹进行成像。

注意：本产品用于检测非常敏感，必须非常仔细的优化单个分析成分(抗体，偶联物等)，以尽量减少非特异性反应导致本底过高。