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间充质干细胞

骨髓基质细胞的主要功能曾被认为是作为造血干/祖细胞的支架。骨髓基质是由包括内皮细胞、纤维母细胞、脂肪细胞和成骨细胞等不同来源的细胞组成的，这些细胞中的一部分对造血干细胞的增殖和分化起正向或负向调节作用。 基质细胞中还包括一些能自我更新、并能分化成为骨、软骨、肌肉、肌腱和脂肪等非造血细胞。这些细胞被称为间充质干细胞（MSC）。
　　间充质干细胞和造血干细胞很相似,都很少。大约100，000个骨髓细胞中有一个间充质干细胞。与造血干细胞相似，间充质干细胞也可以分化为很多成熟的细胞。如已经证实间充质干细胞可以分化为成骨细胞。象其它造血干细胞一样，间充质干细胞的表面标志也不是很清楚。但可以用CFU－F检测方法定量检测。培养的细胞可以被传很多代，但仍保持其能分化为各种成熟的细胞的能力。人们用CD45^-，CD34^-，SH2⁺（CD105），SH3⁺，SH4⁺（CD73）等一组抗体来鉴定培养后的间充质干细胞。

间充质干细胞的富集和培养:

　  StemCell公司提供富集和培养间充质干细胞的产品。使用RosetteSep^® 可以从未处理的骨髓中简单、快速地富集人的间充质干细胞。使用MesenCult^® （一种特殊成分的液体培养基和预先筛选过的添加物）可以对间充质干细胞进行CFU-F 定量分析。并可对间充质干细胞进行体外扩增。如果使用不同的促分化的添加物，可以使其分化为不同的组织，如脂肪和骨。

CFU-F检测:

　  将人骨髓采用密度梯度离心或氯化铵处理，之后将得到的细胞放置在100 mm培养皿中使用MesenCult^® #05401和 #05402培养。培养条件为37℃，5％CO2，培养14天。培养结束后，将培养基倒掉，并用PBS将未贴壁的细胞洗掉。用甲醛固定，并用Wrights Giemsa 染色。

无异种成分（Xeno-free）间充质干细胞培养

MesenCult^®-XF培养基可提供人间充质干细胞以无异种成分，无血清的长期培养环境。与传统培养基相比无异种成分培养基可使间充质干细胞扩增速度更快，且在早期传代时可明显降低造血细胞的污染。

MesenCult^®-XF必须与MesenCult®-XF Attachment Substrate（#05424）和MesenCult^® Dissociation Kit(#05426)联合使用，其中成分保证 MSC以MesenCult^®-XF培养基培养时可充分贴壁。

临床上间充质干细胞可用于治疗多种疾病。使用无血清无动物成分的培养基，可减少植入的细胞给病人带来的疾病传播和免疫反应。MesenCult^®-XF的成功研发，对间充质干细胞用于临床治疗起到了巨大的推进作用。培养基中去除了不确定的成分——血清，从而减少了传统培养条件的不稳定性，使间充质干细胞培养的实验结果更稳定。

MesenCult^®-XF用途：

1.       人骨髓以及培养扩增来源的间充质干细胞扩增

2.       间充质干细胞的长期培养（>8代）

3.       原代以及培养扩增后的间充质干细胞的CFU-F计数。

无异种成分培养优点：

l          无血清配方

l          无动物成分

l          可维持细胞多向分化潜能

l          细胞生长速度更快

l          可减少造血细胞的污染

l          减少了实验间的批次差异