线粒体DNA（mtDNA）是进行分子进化研究和母性遗传研究的重要材料，但传统的两步式mtDNA提取方法是先温和裂解细胞，分离线粒体，然后再从线粒体中提取mtDNA。此方法中的温和裂解细胞的条件十分难以控制，需要针对不同组织材料单独进行优化。本方法克服了上述缺点，具有下列优点：

1. 不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。

2. 得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3. 每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3-5

μg mtDNA。

4. 注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料。

使用及效果

在107个细胞或1克剪碎的组织中加入0.25 mL溶液A，吹打分散，再加入0.25 mL溶液B，混匀后冰浴8分钟，加入0.35  mL溶液C后混匀，12000  g离心10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中，离心1分钟，用0.5 mL 的通用洗柱液洗两次，最后用30-50 μL DNA洗脱液将mtDNA洗脱。

用本产品从新鲜猪肝中提取mtDNA，原液稀释10000 倍后取10 μL做为PCR 模板， 分别用三对猪线粒体DNA专一性引物进行扩增， 用其中的1/2上样电泳。电泳染料为绿如蓝。

线粒体是合成ATP和脂肪酸的细胞器，每个细胞有多个线粒体，每个线粒体有多个基因组，例如每个酿酒酵母（S．cerevisiae）细胞里有20多个线粒体，人淋巴细胞有数个，肝细  胞有500-2500个，卵母细胞有上千个。除少数低等真核生物线粒体基因组为线状DNA外，其他生物的线粒体基因组都是环状DNA。线粒体基因组缺乏组蛋白，故无核小体。哺乳动物的线粒体基因DNA没有内含子，几乎每一对核苷酸都参与一个基因的组成，有许多基因的序列是重叠的。不同物种的线粒体基因组的大小相差悬殊，在动物中的趋势是物种越高等，mtDNA越小，排列越紧密。下表是常见物种mtDNA的大小列表

人mtDNA只有D环区（D-loop，参与复制启动）和另外87个bp不是编码基因外，其余序列共编码13个蛋白质（细胞色素b、细胞色素氧化酶的3个亚基、ATP酶的2个亚基以及NADH 脱氢酶的7个亚基）、24个rRNA（包括1个16SrRNA、1个12SrRNA和22个tRNA）。人类        的神经肌肉变性疾病如Leber氏遗传性视神经病、帕金森病、早老痴呆症、线粒体脑肌病、母系遗传的糖尿病和耳聋等都同线粒体基因有关。

高等植物mtDNA长度在100 Kb~2000  Kb之间，大部分由非编码的DNA序列组成，且有许多短的同源序列，同源序列之间的DNA重组会产生较小的亚基因组环状DNA，与完整的“主”基因   组共存于细胞内，因此植物线粒体基因组的研究更为困难。

与细胞核DNA相比，mtDNA具有下列特点：①突变率高，是核DNA的10-100倍左右，  有利于检查出在较短时期内基因发生的变化，有利于比较不同物种的相同基因之间的差别，确定这些物种在进化上的亲缘关系；②母性遗传(maternal   inheritance)，这是由于动物精子的细胞质极少，子代mtDNA基本上都是来自卵细胞，因此具有相同mtDNA序列的个体必定是来自一位共同的雌性祖先。