6XSafe Dye Loading Buffer

描述：海基研发的全新一代 EB 替代染料－Safe DyeTM，安 全、灵敏度高、稳定性好，使用 Safe DyeTM EB 替代染料配 制而成的 Loading Buffer 和 DNA Marker 具有安全、灵敏度 高、稳定性好、使用方便等优点。使用 Safe DyeTM EB 替 代染料时，在制胶过程中无需加入 EB、SYBR Green 和 GoldView 等核酸染料，只需将 DNA(PCR 产物、质粒或基 因组 DNA)与 Loading Buffer 充分混合即可进行凝胶电泳。 由于 Safe DyeTM EB 替代染料的激发波长与 EB 激发光波长 相同，故无需更换实验设备。海基推出的 Safe Dye 真正实 现了安全、灵敏度高、定性好的保证，成为真正的 EB 替代 染料，是广大实验室工作人员的最佳选择。 主要特征 z 安全：经细胞学试验证明 Safe DyeTM EB 替代物不能 穿透胞膜，具有极低的细胞毒性和诱变性。 z 高灵敏度：等于或稍高于 EB，远远高于 GoldView 和 SYBR Green。 z 毒性与灵敏度比较： SYBR Green/GoldView: 低毒/低灵敏度 Safe DyeTM: 极低毒性/高灵敏度 EB: 剧毒/高灵敏度 z 使用方便：无需加入凝胶中，只需将 DNA 与 Loading Buffer 充分混合即可进行凝胶电泳，电泳后可直接进行 观察。 z 简化制胶过程：1min 即可制备琼脂糖凝胶。 z 由于该染料无需添加入凝胶中，使制备的凝胶可保存更 长时间，从而节省凝胶的用量。 z 激发波长与 EB 激发光波长相同，无需更换实验室设备。 z 稳定性高于 EB、SYBR Green、GoldView，可长期储 存。 储存：室温避光长期保存，可保存一年。 使用方法比较 染料种类 Safe Dye EB GoldView 微波炉熔胶 1min 1min 1min 凝胶温度降至 65℃ 0min 10min 10min 倒入制胶槽中制胶 √ √ √ Total time 1min 11min 11min 使用方法（1％琼脂糖凝胶制备为例） 1.称取 1 g 琼脂糖，加入至 100 ml 1×TAE（或 1×TBE）缓 冲液中，微波炉加热至凝胶全部熔化。 2.将熔化的凝胶，直接倒入制胶槽中，室温冷却约 15min 使 凝胶凝固成型。 3.吸取 5 μl 样品与 1 μl 6×Safe DyeTM Loading Buffer 混合 均匀后，直接点样于琼脂糖凝胶上样孔内。 注意：样品与 6×Safe DyeTM Loading Buffer 务必混合均 匀，使 DNA 与染料充分结合，混合后室温放置 1~5min 后 再点样效果优佳。 4.凝胶置于 1×TAE（或 1×TBE）电泳缓冲液中电泳 20~40min，电泳时间根据 DNA 片段大小决定。 5.电泳完毕后放置于紫外灯下观察结果。 细胞毒性比较 Fig.分别使用 1×SYBR Green I 和 Safe Dye 对细胞进行 37℃孵 育，并分别在 5 分钟和 25 分钟时段进行观察。结果表明 SYBR Green I 染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色，而 Safe Dye 则因为不能穿透细胞膜而不能进入细胞，证明 Safe Dye 是安 全的。

目前国内大多数实验室使用的最普遍的核酸染料包括EB (溴化乙啶）、SYBR Green和GoldView，而这几种染料在安全性、稳定性和灵敏性方面都存在着不可忽视的缺点。其中EB是目前使用最广泛的核酸染料，其灵敏度相对较高，但它是一种剧毒且具有高诱变性的化学物质，极大的危及实验人员的身体健康；而SYBR Green稳定性差，在微碱性的电泳缓冲液中极易降解；市面上的GoldView则灵敏度较差，会影响实验结果的真实性。为解决上述问题，海基研发的全新一代EB替代染料-Safe Dye，安全、灵敏度高、稳定性好，使用Safe Dye EB替代染料配制而成的Loading Buffer和DNA Marker具有安全、灵敏度高、稳定性好、使用方便等优点。 使用Safe Dye EB替代染料时，在制胶过程中无需加入EB 、SYBR Green和GoldView等核酸染料，只需将DNA(PCR产物、质粒或基因组DNA)与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳。由于Safe Dye EB替代染料的激发波长与EB激发光波长相同，故无需更换实验设备。海基推出的Safe Dye真正实现了安全、灵敏度高、稳定性好的保证，成为真正的EB替代染料，是广大实验室工作人员的最佳选择。
主要特征
安全保证：是EB、SYBR Green、GoldView染料新型的代替物，经细胞学试验证明Safe Dye EB替代物不能穿透细胞膜，具有极低的细胞毒性和诱变性。 高灵敏度：等于或稍高于EB，远远高于GoldView和SYBR Green。 使用方便：无需加入凝胶中，只需将DNA(PCR产物、质粒或基因组DNA)或RNA与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳，电泳后可直接进行观察。 简化制胶过程：1min即可制备琼脂糖凝胶。 由于该染料无需添加入凝胶中，使制备的凝胶可保存更长时间，从而节省凝胶的用量。 激发波长为300nm（或310nm），与EB激发光波长相同，无需更换实验室设备。 稳定性高于EB、SYBR Green、GoldView，可长期储存。
储存
室温避光长期保存，可保存两年。
使用方法比较
染料种类 Safe Dye EB(溴化乙啶) SYBR Green/GoldView (极低毒/高灵敏度) (剧毒/高灵敏度) (低毒/低灵敏度) 微波炉熔胶 1min 1min 1min 等待凝胶温度降至65℃ 0min ～10min ～10min 倒入制胶槽中制胶 √ √ √ 总共费时 1min ～11min ～11min
细胞毒性比较
	Fig.分别使用1X SYBR Green I和Safe Dye对细胞进行37℃孵育，并分别在5分钟和25分钟时段进行观察。结果表明SYBR Green I染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色，而Safe Dye则因为不能穿透细胞膜而不能进入细胞, 证明Safe Dye是安全的。

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