M-MLV逆转录酶
产品名称： M-MLV逆转录酶
英文名称： M-MLV Reverse Transcriptase
产品编号： M1701
产品价格： 0
产品产地： 北京通州区马驹桥镇联东U谷中区85A索莱宝
品牌商标： solarbio
更新时间： 2023-08-11T10:26:26
使用范围： null
北京索莱宝科技有限公司
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M-MLV逆转录酶
品牌：Solarbio | 货号：M1701
1、产品简介
莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV RT）是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）转录为cDNA。M-MLV RT的RNase H活性相对于禽成髓细胞瘤病毒反转录酶较弱，更适合用来反转录较长的mRNA。M-MLV RT应用于以RNA为模板合成cDNA的第一条链。
注意：M-MLV RT的延伸性要低于AMV 反转录酶，因此要得到和用AMV 反转录酶一样产量的cDNA需加入更多单位的M-MLV反转录酶。
2、使用方法
1）使用方法简介以用2?g总RNA为例。在无RNase离心管中，加入0.5?g引物至含总RNA的样品中，总体积不大于15?l。70℃，5分钟打开模板链形成的二级结构。立即放于冰上降温防止二级结构恢复，随后短暂离心使液体集中在离心管底。
2）加入以下成分到已退火后的引物-模板混合物中。
注意：不要改变引物的加入比率。
M-MLV 5×Reaction Buffer 5ul
dATP，10mM 1.25ul
dCTP，10mM 1.25ul
dGTP，10mM 1.25ul
dTTP，10mM 1.25ul
Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor 25 units
M-MLV RT 200 units
无核酸水至最后体积 25ul
3）轻轻混匀离心管，如果使用随机引物在37℃孵育60分钟，其他引物则42℃孵育。延伸温度在37～42℃之间最佳。
4）M-MLV RT 用于合成cDNA的第一链。往后的合成则需要根据需要自行设计引物再次合成。
3、Buffer组成
M-MLV RT 5×Reaction Buffer
250mM Tris-HCl（PH 8.3 室温下）
375mM KCl
15mM MgCl2
50mM DTT
4、来源
大肠杆菌表达纯化
莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV RT）是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）转录为cDNA。M-MLV RT的RNase H活性相对于禽成髓细胞瘤病毒反转录酶较弱，更适合用来反转录较长的mRNA。M-MLV RT应用于以RNA为模板合成cDNA的第一条链。
注意：M-MLV RT的延伸性要低于AMV 反转录酶，因此要得到和用AMV 反转录酶一样产量的cDNA需加入更多单位的M-MLV反转录酶。
2、使用方法
1）使用方法简介以用2?g总RNA为例。在无RNase离心管中，加入0.5?g引物至含总RNA的样品中，总体积不大于15?l。70℃，5分钟打开模板链形成的二级结构。立即放于冰上降温防止二级结构恢复，随后短暂离心使液体集中在离心管底。
2）加入以下成分到已退火后的引物-模板混合物中。
注意：不要改变引物的加入比率。
M-MLV 5×Reaction Buffer 5ul
dATP，10mM 1.25ul
dCTP，10mM 1.25ul
dGTP，10mM 1.25ul
dTTP，10mM 1.25ul
Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor 25 units
M-MLV RT 200 units
无核酸水至最后体积 25ul
3）轻轻混匀离心管，如果使用随机引物在37℃孵育60分钟，其他引物则42℃孵育。延伸温度在37～42℃之间最佳。
4）M-MLV RT 用于合成cDNA的第一链。往后的合成则需要根据需要自行设计引物再次合成。
3、Buffer组成
M-MLV RT 5×Reaction Buffer
250mM Tris-HCl（PH 8.3 室温下）
375mM KCl
15mM MgCl2
50mM DTT
4、来源
大肠杆菌表达纯化
5、保存条件
-20℃保存。避免经常冻融