miRNA在不同组织中丰度变化大，例如，miR-133在骨骼肌中表达很高，在心肌中表达低，而在其它组织未检测到。要检测低丰度的miRNA需要高灵敏的方法。Signosis基于多生物素信号放大专利技术开发出高敏miRNA Northern Blot检测试剂，高灵敏度检测和验证miRNA表达、组织分布、芯片分析结果，可以直接目测miRNA表达水平的差异以及成熟miRNA的大小，特别是在检测低丰度miRNA方面，具有明显优势，较常规的单生物素化学发光检测灵敏度高10-100倍。

A.     产品优势

预制探针——生物素预标记探针，无同位素污染；

自有专利——基于多生物素信号放大专利技术开发；

灵敏度高——较常规基于单生物素的检测灵敏10-100倍；

步骤简单——总RNA点样杂交，HRP酶检测。

B.      技术原理

RNA样本经过凝胶电泳分离后，转移至膜上。目标miRNA的表达通过生物素标记探针进行检测。生物素标记探针包含两个部分：miRNA的互补序列部分和标签序列部分。互补序列与miRNA结合，标签序列则与多生物素信号放大分子结合，实现对低丰度miRNA分子的高灵敏度检测。

C.     结果展示

用高敏miRNA Northern Blot检测试剂分析骨骼肌总RNA中的miR-133和HeLa细胞总RNA中的miR-21，并对不同总RNA浓度条件下，高敏Northern Blot检测试剂和常规Northern Blot检测试剂的检测灵敏度进行比较。

D.     产品应用实例

1)      Bicistronic Gene Transfer Tools for Delivery of miRNAs and Protein Coding Sequences. Stoller ML, Chang HC, Fekete DM. Int J Mol Sci. 2013 Sep;14(9):18239-55.

2)      Characterization of the stress associated microRNAs in Glycine max by deep sequencing. Li H, Dong Y, Yin H, Wang N, Yang J, Liu X, Wang Y, Wu J, Li X.BMC Plant Biol. 2011 Nov 23;11:170.

Identification and characterization of microRNAs from Phaeodactylum tricornutum by high-throughput sequencing and bioinformatics analysis. Huang A, He L, Wang G.BMC Genomics. 2011 Jun 30; 12:337.