结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber） 是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方 法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和 肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子 量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿 或苯胺蓝的分子量很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原 纤维和肌纤维。 

    Masson 试剂盒的特点：◆染色稳定；◆分化时间短，1-2 秒；◆色彩清楚鲜艳；◆使用范围广，适宜于 组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；◆所染切片保存时间长且不易褪色。 

产品组分 注：临用时，取 A1 溶液、A2 溶液等量混合，成为 Weigert 铁苏木素染色液，不可预先配制后放置。 

准备材料： 固定液：选用甲醛升*或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 名称 规格 SL7230-50ml SL7230-100ml Storage A 液 A1 溶液 25ml 50ml RT A2 溶液 25ml 50ml RT B 液 酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT C 液 丽春红品红染色液 50ml 100ml RT D 液 弱酸溶液 50ml 100ml RT E 液 1%磷钼酸溶液 50ml 100ml RT F 液 苯胺蓝染液 50ml 100ml RT 说明书 1 份 

使用说明： 

1、 切片常规脱蜡至水。 

2、 A 液染色 5min-10min。 

3、 B 液分化、水洗。 

4、 水洗几分钟至返蓝。 

5、 C 液染色 5-10min。 

6、 在上述操作过程中按 蒸馏水：D 液=2:1 比例配置弱酸工作液，用弱酸工作液洗 1min。 

7、 E 液洗 1-2min 

8、 用配置好的弱酸工作液洗 1min。 

9、 直接放入 F 液中染色 1-2min。 

10、用配置好的弱酸工作液洗 1min。 

11、95%乙醇快速脱水。 

12、无水乙醇脱水 3 次，每次 5-10s。 

13、二甲苯透明 3 次，每次 1-2min。 

14、中性树胶封固。 

染色结果：

注意事项： 

1、 切片脱蜡应尽量干净。 

2、 取 A1、A2 等量混合，成为 Weigert 铁苏木素染色液，一般 4 小时失去染色能力。 

3、 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。 

4、 经典 masson 三色染色中，用 Harris 苏木精染核，但 Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，本染液 采用 Weigert 染细胞核，因为染色的目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。 

5、 酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。 

6、 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。 

7、 磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而 定，一般 1-2min。