产品特点：高纯度：提取的质粒DNA可直接用于转染等高纯度要求实验； 高得率：HYQ特有的吸附柱最大可以结合1mg质粒DNA； 高效率：步骤少，操作简单，60分钟可完成质粒提取； 低污染：无需苯酚、氯仿等有机溶剂，实验废弃物不含有害化学物质。
操作步骤：
大肠杆菌培养
 1.取200 μL新鲜的菌液接种到100-250 mL (勿超过 250 mL)的LB培养基（含适量抗生素），37℃震荡培养14-16小时。室温下5,000 g离心10分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
* 不建议过度培养 (>16 小时) ，因为大肠杆菌会降解而且质粒的产量会降低。
* 不要直接转接甘油冻存的菌。
* 对于在LB培养基中培养的大肠杆菌上述操作步骤是最佳的，当使用 TB or 2xYT 培养基时，一定要确保细菌的密度OD.600不要超过3.0。如果菌液过多，按比例相应的增加 Buffers。
质粒DNA大量提取
2. 加入10 mL Buffer B1（确保已加入RNase A），用移液器或涡流震荡确保细菌沉淀重新悬浮。 
注：不完全悬浮易导致菌体裂解不完全，从而使产量降低。
3. 加入 10 mL Buffer B2, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀，然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。 
注：切勿剧烈振荡。静置时间不应超过5分钟，时间过长会导致基因组DNA污染或质粒受到破坏。若溶液未清亮澄清，则表明菌体裂解不充分，应加大Buffer B2的用量或减少菌体量。
4. 加入12 mL Buffer B3, 立即反转5次，用手用力摇晃3-5次充分混匀，此时出现白色絮状沉淀。
5.将离心管转至高速离心机，在室温下12,000 g 离心10分钟（若上清中有白色沉淀，可再次离心）小心吸取离心后的上清液至一干净的50 mL管中（注意避免吸起沉淀）。
注：低温下RNase效率低，易有RNA污染。如果离心机转子较冷，将离心管在室温下温育10分钟后再离心。

6..立即转移20 mL裂解液/乙醇混合液至带收集管的DNA柱中，室温下4,000 g离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。重复此步直至所有的溶液通过DNA柱。
7. 向离心柱中加入10 mL Buffer KS，室温下4,000 g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
8.向离心柱中加入20 mL 70% 乙醇，室温下4,000  g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
9.重复步骤“8”。
10. 将离心柱放回高速离心机中，室温下5,000 g开盖离心10分钟，以彻底去除残留的乙醇。 
注：此步骤中开盖离心将会更有效的去除残留的乙醇，乙醇是否去除干净将会影响最后的洗脱效率。
11. 将离心柱转至一个新的50 mL离心管中，向DNA柱膜的正中加入1.5 mL的Buffer ES, 室温放置1分钟，5,000 g 离心5分钟，以洗脱质粒DNA。将50 mL离心管中的洗脱液上柱再放置洗脱1分钟，5,000 g 离心5分钟。 两次洗脱将提高得率。
质粒大量提取试剂盒
 
货号
规格
价格
HG103-01
10次
680元
HG103-02
25次
1480元
 
http://www.hyqbio.com.cn/index.php?case=archive&act=show&aid=48