BCA方法是近年来广泛应用的蛋白质定量方法。其原理是，在碱性环境下蛋白质分子中的肽键结构与二价铜离子络合并将二价铜离子还原为一价铜离子。BCA与一价铜离子结合形成稳定的蓝紫色络合物。该复合物在562 nm处有较高的吸光值，并与蛋白质浓度呈正比。

Bradford方法是由Bradford于1976年建立的。该方法的原理是带负电的考马斯亮蓝染料与蛋白质中碱性氨基酸相互作用。考马斯亮蓝G250,在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm，当与蛋白质结合后，其显蓝色（或青色），在595nm处有最大光吸收。595nm处的吸光值与蛋白质的浓度呈正比。

灵敏度和线性浓度范围：

BCA法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到0.5μg，在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系；

Bradford法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到1μg，在 50～1000 µg/mL浓度范围内有良好的线性关系。

反应速度以及反应产物稳定性：

BCA 法测定需要反应时间，每个样品需要 45 min左右可以完成检测。反应（保温）结束后，需要在10 min 内完成后续测定，因为光吸收值会按照2.5%/10 min的比例升高。

Bradford法测定速度快，每个样品只需要5 min左右可以完成检测。其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5-20 min之间，颜色的稳定性最好。

蛋白浓度测定方法选择（干扰项小于此浓度）:

含还原剂的蛋白提取液使用Bradford方法；含表面活性剂的蛋白提取液使用BCA方法。干扰项见下表。