适用范围

NF-2可直接裂解释放样品核酸（DNA/RNA），无需核酸抽提，直接取混合液上清作为模板进行核酸PCR扩增或恒温扩增，且缓冲液对核酸扩增的酶有特异性保护。

NF-2适用于所有临床样品（唾液、新鲜全血、血清、肺泡冲洗液、尿液、组织、环境）中细胞(真核、昆虫等)和病原体（病毒、支原体、衣原体、细菌等）采集后的高效灭活，含病原体的液体样品加入缓冲液后5min即可灭活裂解病原体，并高效释放出核酸。

混合液无需再抽提核酸，可直接取上清作为模板进行PCR或者恒温扩增检测。NF-2对核酸扩增酶（Taq酶、反转录酶、Bst酶、RPA酶等）无任何抑制，不影响扩增效率。

液体样本加入NF-2后，裂解出的核酸可在常温（22～25℃）保持稳定不降解，DNA可保持6个月；RNA可保持稳定性10天，4℃可保存个6个月，－80℃可保存1年。

释放步骤

 1 血清、唾液、痰液、尿液、拭子采集液、细胞培养液等液体样本

（1） 取NF-2 150μL置于1.5mL离心管内，再取液体待检样本50μL，充分反复吹打混匀2-5次，室温（22～25℃）垂直放置静止≥2min即可。

（2） 如果是新鲜全血，则取10μL全血，加入100μL NF-2液中，充分反复吹打混匀2-5次，室温（22～25℃）垂直放置静止≥2min即可。

注意：完全溶血的全血不适用本方法，必须进行核酸抽提方可进行检测。

2 组织固体样本

取NF-2 300μL置于1.5mL离心管内，再取黄豆至花生粒大小的组织样品加入缓冲液中，用剪刀充分剪碎，充分反复吹打混匀3-5次，室温（22～25℃）垂直放置静止作用≥5min。5min后，取混合液上清2.5μL作为核酸扩增模板，进行实时荧光或常规PCR扩增，或者恒温扩增（LAMP、RPA、RCA等）。

注意：亦可加入生理盐水组织匀浆后取上清液，按照液体样本进行操作。

扩增取样

直接取混合液上清2.5μL作为核酸扩增模板，进行实时荧光或常规PCR扩增，或者恒温扩增（LAMP、RPA、RCA等）。注意：模板的体积应≤核酸反应总体积的10%。即25μL的反应体系加入的混合上清不超过2.5μL，50μL的反应体系加入的混合上清不超过5μL。

注意事项

1.病原体免抽提直扩不但与样品前处理液有关，还与PCR反应液的配方密切相关。直扩法的PCR反应液中多加入了较常规PCR反应液较高的KCl浓度中，以增加直扩的可能性。

2.严禁饮用、触摸接触NF-2，会对皮肤造成伤害。

3.为保证生物安全，待检样本加入采样管后必须等待5min，待病原体彻底灭活后方可开盖进行检测。

4.采集标本须新鲜，及时检测，以提高检测率和检测敏感性。

运输贮存

NF-2常温运输，4℃保存3年，常温保存2年。

核酸释放剂NF-2，通用型_核酸释放与保存_分子诊断_产品_深圳市柏雷丁生物有限公司 (braveds.com)

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