大肠杆菌Turbo菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌Turbo菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌Turbo菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌Turbo菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC1345 VSMC 大鼠胸主动脉平滑肌细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC1211 SNU398 人肝癌细胞 人 DMEM 贴壁+悬浮

EC524 CCC-HHM-2 人胚心肌组织来源细胞 人 DMEM 贴壁

EC637 HCFB 人心肌成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC525 CCC-HEH-2 人胚心肌组织来源细胞 人 DMEM 贴壁

EC526 MT2 人T淋巴细胞白血病细胞 人 1640 悬浮

EC548 HMSC 人骨髓间充质干细胞 人 McCoy’s 5a 贴壁

EC528 HL-1 小鼠心房肌细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC1307 TU212 人喉癌细胞 人 1640 贴壁

EC549 SNU-C1 人结肠癌细胞 人 1640 贴壁

EC618 HSF 人皮肤成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC814 M-20 人胚胎成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC556 HNEpC 人鼻粘膜上皮细胞 人 1640 贴壁

EC529 HFTF 人胚胎眼Tenon＇s囊成纤维细胞 人 MEM 贴壁

EC530 MSC 猪骨髓间质干细胞 猪 1640 贴壁

EC531 SJSA-1 人骨肉瘤细胞 人 DMEM 贴壁

EC532 MC38 小鼠结肠癌细胞 小鼠 1640 贴壁

EC557 MeT-5A 人膜间皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC1286 TE354.T 人皮肤基底细胞癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC906 Mouse podocyte 小鼠肾足细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC907 Rat podocyte 大鼠肾足细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC533 兔软骨细胞 兔 DMEM 贴壁

EC558 HCM 人心肌细胞 人 DMEM 贴壁

EC1231 SU-DHL-6 人B细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC559 RC-K8 人B细胞淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC534 NCI-H929 人骨髓瘤细胞 人 IMDM 悬浮