常温稳定BL21(DE3)感受态细胞
产品名称: 常温稳定BL21(DE3)感受态细胞
英文名称: Extremely Stable BL21(DE3) Competent Cells
产品编号: HZ0079
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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常温稳定BL21(DE3)感受态细胞
中文名称:常温稳定BL21(DE3)感受态细胞
英文名称:Extremely Stable BL21(DE3) Competent Cells
产品规格:100μl×10支
本制品室温可保存1个月、-20℃可保存2年(推荐保存温度)、-80℃可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可室温运输、可常规冰袋运输(推荐运输温度)。本BL21(DE3)感受态细胞为热激感受态细胞,专门用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42℃热激1分钟可获得105~106cfu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。
产品组成:
保存条件:-20℃可保存半年,-70度可保存2年;可室温运输。
使用方法:
1.从-20℃冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。
注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20℃保存。
2.取50μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2ml EP管中,加入1~20ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2~5分钟。
注意:放置时间不要超过30分钟,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。
3.将上述混合物(50μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15分钟。
注意:使用RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4.置于42℃热激1分钟后,迅速置于冰上急冷2分钟。
5.向热激完毕的感受态细胞中,加入450μl不含抗生素的SOC培养基(或LB培养基),37℃振荡(225 rpm)培养60分钟。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
6.取200μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
7.将平板置于37℃培养,12~18小时后可出现菌落。
8.获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!