LAMP SYBR Green荧光扩增试剂盒

描述：Bst DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分，具有很强的链置换活性，以及 5’→3’的 DNA 聚合酶活性，因此可以应用于 LAMP (Loop-mediated isothermal amplification)检测实验。该制 品内含 Bst4.0 DNA 聚合酶因此既可以扩增 DNA，也可以 直接扩增 RNA 分子。 LAMP 是一种新型核酸扩增技术。采用 4 或 6 条能够 识别目的基因上的 6 个特异区域的引物，依赖与 Bst DNA 聚合酶的强链置换活性，在 30~60 分钟内 DNA 扩增可达 109 ~1010 倍。本试剂盒采用 SYBR Green 染料实时监测 LAMP 扩增结果。 组分 名称 50T LAMP SYBR Green Reagent 1 瓶 LAMP Buffer 0.75 ml 使用方法： 1. LAMP SYBR Green Reagent 为干粉形式，包含 Bst 4.0 DNA 聚合酶、dNTP 等，在未溶解前，该制品可-20℃ 长期保存，并可室温运输，性能无下降。使用前每瓶用 0.75ml 的 LAMP Buffer 溶解后，可立即使用，剩余试剂 可在-20℃保存 1 个月，在-60℃以下长期保存。 2. 按以下组分配置反应混合液 溶解后的 LAMP SYBR Green Reagent 15 μl LAMP Primer Mix 0.5 or 1 or 1.5 μl 模板 DNA or RNA 1 μl ddH2O 到总体积 20 μl 首次实验时 LAMP Primer Mix 分别采用 0.5、1、1.5 μl 进行实验测试。 3. 荧光定量 PCR 仪的设置 LAMP SYBR Green 的检测可以使用标准定量 PCR 仪 （也可使用恒温荧光设备）。 使用定量 PCR 仪进行 LAMP SYBR Green 扩增程序： 步骤 1：60℃ 10s 步骤 2：60℃ 50s 收集信号，循环 25 次 总反应时间为 25min。 （在 LAMP 反应结束后禁止将反应管盖打开，否则可能 会导致气溶胶污染）。一旦发生气溶胶污染，请使用 的 DNA 气溶胶污染去除剂（A6001）进行环境 清理。 LAMP 实验的条件优化 （1）LAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。 （2）对成功建立 LAMP 检测方法至关重要的四个参数分 别是：引物位置、引物使用浓度、反应温度（60~65℃） 和反应时间。引物使用浓度、反应温度是优先要确认的参 数，如经过参数调整后仍不能达到检测用标准，则重新设 计引物组合，再进行测试。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！