冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)
产品名称: 冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)
英文名称: 冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)
产品编号: HZ2311
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)
描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 反 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA 的 LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA 的 LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP、 Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 货 号 名 称 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase:2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase、20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor、22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20℃,可保存 2 年。短期保存置于 4℃, 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 在 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C) 进行反应 20~45min。 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 的 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。
由于PCR对核酸的扩增效率极高,在诊断PCR实验中,非常容易造成移液器、台面、PCR仪、空气等气溶胶污染。当实验环境被污染后,会导致阴性样本的假阳性结果。本试剂中,将dNTP中的dTTP全部更换为dUTP,从而使得扩增后的PCR产物中包含dU碱基。在随后的实验中,含有气溶胶污染的dU PCR产物,将被本试剂中的UNG糖基化酶降解,从而去除了气溶胶的污染效应,本试剂中的UNG酶在37度孵育2分钟,即可消除高达10万个Copy的核酸污染物。因此,本制品是诊断定量PCR检测的最佳试剂。 冻干Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)是以RNA为模板采用TaqMan探针法进行Real-Time PCR的专用试剂,适合于FAM/HEX/TET/JOE等双标记探针(本品也适用于Molecular Beacon探针),其中冻干的TaqMan qPCR Reagent将热启动Fast Taq DNA聚合酶、耐热反转录酶、dNTP/dUTP、热敏UNG等做成冻干品试剂,制品性能稳定,可长期保存。当加入2×TaqMan Buffer溶解后,试剂变为常规One-Step TaqMan PCR单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、探针、RNA模板、水即可。 制品中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性,因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度,因此满足快速PCR程序,通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力,同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。 |
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组分 |
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主要特征 |
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应用 |
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基因检测和基因诊断试剂开发。 | ||||||||
储存 |
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1. Lyophilized Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)为干粉形态,每瓶可用于100次的扩增反应。 2. Lyophilized Fast RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)为干粉形态,可置于室温保存12个月,-20℃长期保存,并可采用室温运输。 3. 冻干制品经2×TaqMan PCR Buffer溶解后,可于-20℃长期保存。 |
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!