小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 ELISA北京检测/小鼠PAI-1 ELISA血清代测
产品名称: 小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 ELISA北京检测/小鼠PAI-1 ELISA血清代测
英文名称: Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit
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产品产地: 加拿大/中国
品牌商标: 北京方程
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小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 ELISA北京检测/小鼠PAI-1 ELISA血清代测
用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 ELISA北京检测/小鼠PAI-1 ELISA血清代测
Elisa实验常用方法:
双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原,形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量=抗原量。
小小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1 ELISA北京检测/小鼠PAI-1 ELISA血清代测
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(2)标记的抗原:a.含HIV-1B亚型gp41和P24的HIV-1重组融合蛋白。b.可特异性检测血清或血浆中HIV M群的抗体,绝大多数HIV-1.0群和HIV-2群的抗体。c.gp36免疫调控区的HIV-2多肽可测定特异性的HIV-2抗体。d.gp41的俩段HIV 1.0群多肽,可测特异性HIV 1.0 群的抗体 和HIV 1M群的抗体。HIV-1.0.2对759份各类临床样品包括401份HIV-1感染不同阶段病人样品,204分HIV-2感染不同阶段病人样品,和154份与HIV无关的其他疾病患者的样品的检测结果。特异性:99.93% 灵敏度:100%
Elisa相关小常识:
酶与底物 酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物。是ELISA成败的关键试剂,它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应,还具有酶促反应,显示出生物放大作用,但不同的酶选用不同的底物。